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武漢貝科新肽科技有限公司

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原位雜交檢測(cè)-湖北原位雜交-武漢貝科新肽科技公司(查看)

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原位雜交技術(shù)在許多領(lǐng)域都有應(yīng)用,以下是其中幾個(gè)具體應(yīng)用:

細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué):在細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)常被用于研究基因的表達(dá)和定位。例如,通過(guò)標(biāo)記特定基因的探針,熒光原位雜交,可以在細(xì)胞或組織中檢測(cè)特定基因序列的存在和分布,進(jìn)而了解基因在細(xì)胞分化、發(fā)育和功能中的作用。

基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究:原位雜交技術(shù)也可用于基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究。例如,通過(guò)標(biāo)記多個(gè)基因探針,可以檢測(cè)基因組中的多個(gè)基因序列,從而進(jìn)行基因定位、基因表達(dá)譜分析、基因突變檢測(cè)等研究。

病毒學(xué)和病原微生物研究:在病毒學(xué)和病原微生物學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)常被用于檢測(cè)和定位病毒、細(xì)菌等病原微生物。例如,通過(guò)標(biāo)記特異性或核酸探針,可以檢測(cè)組織中病原微生物的存在、情況以及分布特征,從而為疾病的預(yù)防、診斷和提供依據(jù)。

總之,原位雜交技術(shù)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、基因組學(xué)、遺傳學(xué)、病毒學(xué)和病原微生物學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,為人類認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象、探究疾病機(jī)制和提供了有力的技術(shù)支持。

而是對(duì)完整的斑馬魚胚胎進(jìn)行探針雜交及檢測(cè),湖北原位雜交,從整體上把握探針的結(jié)合部位,然后對(duì)胚胎進(jìn)行切片,以確定探針結(jié)合的具體位置。整胚原位雜交在斑馬魚分子生物學(xué)研究中是一種非常重要的實(shí)驗(yàn)方法,原位雜交的探針可以是同位素的探針,用自顯影來(lái)檢測(cè);也可以是非同位素的探針,通過(guò)熒光或酶法予以檢測(cè)。我們這兒所介紹的一種原位雜交的方法是通過(guò)后者,以標(biāo)記探針,然后用酶聯(lián)的方法進(jìn)行檢測(cè)。

菌落的裂解及DNA結(jié)合于纖維素濾膜

(1) 在一張保鮮膜上制作一個(gè)裝有0.5mol/L NaOH的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,將濾膜放到小洼上,展平保鮮膜,植物原位雜交,使濾膜均勻濕潤(rùn),讓濾膜留于原處2-3分鐘。

(2) 用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜,用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復(fù)步驟(1)。

(3) 吸干濾膜,將濾膜轉(zhuǎn)移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4)的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜,再重復(fù)一次該步驟。

(4) 吸干濾膜,把它轉(zhuǎn)移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4)的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜,轉(zhuǎn)移到一張干的濾紙上,置于室溫20-30分鐘,使濾膜干燥。

(5) 將濾膜夾在兩張干的濾紙之間,在真空烤箱中于80℃干烤2小時(shí),固定DNA。

(6) 將固定在膜上的DNA與32 P標(biāo)記的RNA進(jìn)行雜交。

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